分類

具體項(xiàng)目

詳細(xì)說(shuō)明

試驗(yàn)核心目的

1. 驗(yàn)證滅菌工藝有效性

確認(rèn)設(shè)定參數(shù)下，即使微生物處于 “最難滅菌位置"（如最冷點(diǎn)、氣體難穿透區(qū)）也能被殺滅。

2. 確認(rèn)條件充分性

通過(guò)高抗性生物指示劑（BI）模擬 “最壞情況"，證明滅菌對(duì)所有產(chǎn)品   / 負(fù)載均可靠。

3. 支持驗(yàn)證與再驗(yàn)證

是滅菌器 IQ/OQ/PQ 驗(yàn)證及周期性再驗(yàn)證的核心組成部分。

核心工具：BI

1. 定義

含已知數(shù)量、特定抗性微生物孢子的載體（孢子條、安瓿瓶、濾紙片等），代表 “最難殺滅微生物"。

2. 菌種選擇（按滅菌方式）

- 濕熱滅菌：嗜熱脂肪芽孢桿菌
  - 干熱滅菌：枯草芽孢桿菌黑色變種
  - 環(huán)氧乙烷滅菌：枯草芽孢桿菌黑色變種 / 嗜熱脂肪芽孢桿菌
  - 輻照滅菌：嗜熱脂肪芽孢桿菌 / 短小芽孢桿菌

3. 關(guān)鍵參數(shù)

孢子數(shù)量：通常為 10?~10? CFU / 載體；需提供每批 BI 的 “活菌計(jì)數(shù)報(bào)告"，確保初始菌量準(zhǔn)確。

BI 放置策略

1. 放置原則

模擬 “條件"，優(yōu)先覆蓋滅菌器 /   負(fù)載中 “最難滅菌位置"。

2. 典型放置點(diǎn)

- 滅菌器腔室：冷點(diǎn)（如排氣口附近、腔室角落）、氣流死角
  - 負(fù)載內(nèi)部：包裝中心、密度最高區(qū)域、堆疊底層

3. 數(shù)量要求

單次試驗(yàn)需放置多個(gè) BI（通常≥3 個(gè)），覆蓋不同關(guān)鍵位置，避免 “單點(diǎn)誤判"。

試驗(yàn)實(shí)操流程

1. 試驗(yàn)準(zhǔn)備

確認(rèn) BI 活性、滅菌器參數(shù)校準(zhǔn)、負(fù)載模擬（與實(shí)際生產(chǎn)一致）。

2. 執(zhí)行滅菌

按設(shè)定參數(shù)（溫度 / 壓力 / 時(shí)間 / EO 濃度等）運(yùn)行滅菌程序，過(guò)程中記錄關(guān)鍵參數(shù)（如腔室溫度、壓力曲線）。

3. 培養(yǎng)與對(duì)照設(shè)置

- 實(shí)驗(yàn)組：取出滅菌后的 BI，按說(shuō)明書培養(yǎng)（24~48 小時(shí)，視菌種而定）
  - 陽(yáng)性對(duì)照：未經(jīng)滅菌的 BI 同步培養(yǎng)（需生長(zhǎng)良好，證明   BI 本身有效）
  - 陰性對(duì)照：無(wú)菌培養(yǎng)基同步培養(yǎng)（需無(wú)菌，排除污染干擾）

4. 結(jié)果判定

實(shí)驗(yàn)組 BI 均為陰性（無(wú)菌生長(zhǎng)）、陽(yáng)性對(duì)照陽(yáng)性、陰性對(duì)照陰性 → 試驗(yàn)合格；反之則需排查滅菌參數(shù)、BI 放置等問題并重試。

試驗(yàn)頻率要求

1. 驗(yàn)證（PQ 階段）

必須執(zhí)行，作為滅菌工藝 “放行" 的核心依據(jù)。

2. 周期性再驗(yàn)證

通常每年 1 次；若滅菌器經(jīng)重大維修（如更換加熱管、密封件），需提前再驗(yàn)證。

3. 變更后驗(yàn)證

滅菌參數(shù)調(diào)整、負(fù)載類型 / 裝載方式改變、BI 批次更換后，需重新執(zhí)行試驗(yàn)。

核心法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)

-   ISO 17665（濕熱滅菌）
  - ISO 20857（干熱滅菌）
  - ISO 11135（環(huán)氧乙烷滅菌）
  - ISO 11137（輻射滅菌）

國(guó)內(nèi)法規(guī)

- 《中國(guó)藥典》（無(wú)菌檢查法、滅菌方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則）
  - NMPA《醫(yī)療器械滅菌驗(yàn)證指南》
  - GMP（藥品 / 醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范）

國(guó)際監(jiān)管指南

FDA《滅菌工藝驗(yàn)證指南》、EU GMP《無(wú)菌藥品生產(chǎn)指南》

核心目標(biāo)：SAL

無(wú)菌保證水平要求

必須達(dá)到 SAL ≤ 10??（即每件物品滅菌后存活微生物的概率不超過(guò)百萬(wàn)分之一），是試驗(yàn)合格的核心指標(biāo)。

濕熱滅菌（蒸汽）

嗜熱脂肪芽孢桿菌

溫度（121℃/132℃）、壓力、滅菌時(shí)間

37~40℃ 有氧培養(yǎng)

需確保蒸汽飽和度（≥95%），避免 “干飽和蒸汽" 導(dǎo)致滅菌失效。

干熱滅菌

枯草芽孢桿菌黑色變種

溫度（160~180℃）、恒溫時(shí)間

30~35℃   有氧培養(yǎng)

負(fù)載需均勻分布，避免堆疊過(guò)密導(dǎo)致 “局部溫度不足"。

環(huán)氧乙烷滅菌

枯草芽孢桿菌黑色變種

EO 濃度、溫度（37~55℃）、濕度、暴露時(shí)間

30~35℃ 有氧培養(yǎng)

需控制腔室濕度（40%~80%），濕度不足會(huì)降低 EO 殺菌效果；滅菌后需充分解析殘留 EO。

輻照滅菌

短小芽孢桿菌

輻照劑量（通常 25~50 kGy）

30~35℃   有氧培養(yǎng)

BI 需緊貼負(fù)載表面 / 內(nèi)部，確保與產(chǎn)品接受相同劑量的輻照。